一文讀懂色譜柱質(zhì)量過(guò)載與體積過(guò)載

液相色譜柱的過(guò)載是指在色譜分析過(guò)程中，由于樣品量或樣品濃度過(guò)高，使得色譜柱內的分離效果受到影響，甚至導致分離失敗。色譜柱的過(guò)載可以分為質(zhì)量過(guò)載和體積過(guò)載，以下是對這兩種過(guò)載的詳細解讀：

定義：質(zhì)量過(guò)載又稱(chēng)為濃度過(guò)載，是指在小體積進(jìn)樣時(shí)（體積未過(guò)載），由于進(jìn)樣濃度較高，靠近譜峰峰帶的固定相被飽和，即進(jìn)樣某一組分超過(guò)了色譜柱的載樣量而出現過(guò)載的現象。

定義：體積過(guò)載是指進(jìn)樣體積過(guò)大，造成柱子的體積超載。

表現：通常會(huì )導致較寬的平頭峰。隨著(zhù)進(jìn)樣體積的增大，峰寬逐漸變寬，峰分離度降低。另外，體積過(guò)載還會(huì )影響峰保留時(shí)間，對保留時(shí)間短的組分影響更大，而對于較后面流出的峰影響較小。

解決方法：為選擇合適的進(jìn)樣體積，需要計算在最佳流速下允許樣品進(jìn)樣的最大體積。最大體積的計算公式為：

其中:L為柱長(cháng)（mm），dc為內徑（mm），dp為粒徑（μm）。如果小伙伴嫌棄公式太繁瑣，也沒(méi)有關(guān)系，貼心的小編已經(jīng)把我們常用的各規格色譜柱列出：

盡管上表中各個(gè)數據是嚴格按照公式計算出來(lái)的，但是這個(gè)數據并不絕對。色譜是經(jīng)驗科學(xué)，較之其他學(xué)科需要更多的實(shí)踐。當然，理論也為我們指引了方向，讓我們能少走彎路。

色譜柱的質(zhì)量過(guò)載和體積過(guò)載都會(huì )對色譜分析結果產(chǎn)生不良影響，包括分離效果降低、保留時(shí)間變化以及檢測器響應降低等。為了避免這些不良影響，需要根據色譜柱的承受能力和樣品的濃度合理調整進(jìn)樣量和進(jìn)樣體積，同時(shí)選擇合適的色譜柱和優(yōu)化分析方法也是預防色譜柱過(guò)載的有效措施。此外，定期對色譜柱進(jìn)行清洗和保養也是保證其分離效果和使用壽命的重要步驟。