液相色譜柱的構造:
1、空柱是由柱接頭、柱管和濾片組合而成的。
柱接頭采用低死體積設計,由兩端螺紋組件組成。一端為7/16英寸外螺紋,另一端為3/16英寸內螺紋(這一標準已在國內外普遍規范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接,中間放置壓環(huán)以確保密封;3/16英寸內螺紋則與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管相連,同樣在中間放置壓環(huán)用于密封。為減少柱外死體積,安裝色譜柱時(shí),應將Φ1.57mm連接管通過(guò)空心螺釘壓環(huán)盡量插入到底,然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)在空心螺釘的壓力下變形并緊密固定在連接管上,連接管通過(guò)壓環(huán)露出的長(cháng)度應嚴格控制在2.5mm或其他固定尺寸內。
在柱接頭的兩端,各安放一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),目的是防止柱填料被流動(dòng)相沖出而造成損失??罩乃胁考捎?16#不銹鋼材質(zhì),能夠抵御一般溶劑的侵蝕。但需要注意的是,含氯化物的溶劑對其具有一定的腐蝕性,因此在使用時(shí),應避免在柱及連接管內長(cháng)時(shí)間存放這類(lèi)溶劑,以防止腐蝕發(fā)生。
2、柱填料:
液相色譜柱的分離功能是通過(guò)填料與流動(dòng)相之間的相互作用實(shí)現的。柱子的分類(lèi)主要是根據填料的種類(lèi)來(lái)進(jìn)行。
正相柱主要采用硅膠作為填料。根據形狀可以分為無(wú)定型和球型兩類(lèi),顆粒直徑通常在3到10微米之間。另一種類(lèi)型的正相填料是帶有—CN、-NH2等官能團的硅膠,即我們所稱(chēng)的鍵合相硅膠。
反相柱主要以硅膠為基礎,表面連接有十八烷基官能團(ODS),形成非極性填料。其類(lèi)型可分為無(wú)定型和球型。
常見(jiàn)的其他反相填料還包括鍵合C8、C4、C2和苯基等,顆粒直徑范圍在3到10微米之間。
液相色譜柱的安裝方法:
1、打開(kāi)柱包裝盒,檢查色譜柱的類(lèi)型、尺寸、出廠(chǎng)日期以及柱內所含的溶劑。
2、將柱兩端接頭的密封堵頭擰下,放回包裝盒以備后用。
3、根據柱管上標示的流動(dòng)相流向,將色譜柱的入口端通過(guò)連接管與進(jìn)樣閥出口相連(條件允許時(shí),建議在柱前使用保護柱);柱的出口則與檢測器連接。連接管為外徑1.57mm、內徑0.1-0.3mm的不銹鋼管,兩端均配有空心螺釘和密封用的壓環(huán)。在連接時(shí),務(wù)必盡量減少柱外的死體積。連接管通過(guò)空心螺釘和壓環(huán)插入后,要盡量用力插到底,然后順時(shí)針擰緊空心螺釘,直到無(wú)法再轉動(dòng)為止。接著(zhù),再用扳手順時(shí)針擰1/4-1/2圈,切忌用力過(guò)大。如發(fā)現色譜柱在流動(dòng)相加壓后有漏液現象,請繼續用扳手順時(shí)針擰1/4圈,直到不再漏液為止。