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  • 高效液相色譜基線(xiàn)“暴走”,五大因素及破解之道大公開(kāi)

    欄目:行業(yè)資訊 發(fā)布時(shí)間:2024-09-18
    在高效液相色譜分析中,基線(xiàn)是指色譜柱經(jīng)流動(dòng)相沖洗,與流動(dòng)相達到平衡后,檢測器在一段時(shí)間內測出的信號曲線(xiàn)。在色譜儀各項檢測條件正常的情況下,基線(xiàn)應平行于時(shí)間軸。

    在高效液相色譜分析中,基線(xiàn)是指色譜柱經(jīng)流動(dòng)相沖洗,與流動(dòng)相達到平衡后,檢測器在一段時(shí)間內測出的信號曲線(xiàn)。在色譜儀各項檢測條件正常的情況下,基線(xiàn)應平行于時(shí)間軸。然而,高效液相色譜基線(xiàn)不穩定可能由多種因素導致,這些因素涉及液相色譜系統的多個(gè)組成部分。以下是一些常見(jiàn)的原因及其相應的解決方法:


    色譜柱相關(guān)因素


    01


    色譜柱未平衡:



      • 原因:色譜柱在更換流動(dòng)相或長(cháng)時(shí)間未使用后,需要一定的時(shí)間來(lái)達到平衡狀態(tài)。在平衡過(guò)程中,基線(xiàn)可能會(huì )出現波動(dòng)。

      • 解決方法:使用中等強度的溶劑沖洗色譜柱,特別是在更換流動(dòng)相時(shí),應先用10到20倍體積的新流動(dòng)相進(jìn)行沖洗,以確保色譜柱充分平衡。

    02


    色譜柱內有氣泡:



      • 原因:色譜柱中的氣泡會(huì )影響流動(dòng)相的流動(dòng)性和色譜峰的形狀,從而導致基線(xiàn)不穩定。

      • 解決方法:在檢測器的水池出口加負壓調節器,以減少氣泡的生成。同時(shí),檢查色譜柱的連接處是否緊密,防止空氣進(jìn)入。


    流動(dòng)相相關(guān)因素


    01


    流動(dòng)相溶解氣體:



      • 原因:流動(dòng)相中的溶解氣體會(huì )在色譜柱內析出,形成微小氣泡,影響基線(xiàn)穩定性。

      • 解決方法:對流動(dòng)相進(jìn)行超聲波脫氣處理,時(shí)間一般為15-30分鐘?;蛘咄ㄟ^(guò)充氮等方式去除溶解氣體。

    02


    流動(dòng)相配比不當或流速變化:



      • 原因:流動(dòng)相的配比或流速的變化會(huì )直接影響色譜峰的分離效果和基線(xiàn)穩定性。

      • 解決方法:根據實(shí)驗需求調整流動(dòng)相的配比和流速,并定期檢查流動(dòng)相的組成及流速,確保其穩定性。


    泵相關(guān)因素


    01


    高壓泵止回閥堵塞:



      • 原因:止回閥堵塞會(huì )導致流動(dòng)相流動(dòng)不暢,引起基線(xiàn)波動(dòng)。

      • 解決方法:拆除單向閥,用超聲波在純水中浸泡20分鐘以上,清除堵塞物。

    02


    高壓泵墊片損壞:



      • 原因:墊片損壞會(huì )導致泵壓不穩,進(jìn)而影響基線(xiàn)穩定性。

      • 解決方法:更換高壓泵的密封墊,確保泵壓穩定。

    03


    泵中有氣泡:



      • 原因:泵中的氣泡會(huì )隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,影響基線(xiàn)穩定性。

      • 解決方法:檢查泵的進(jìn)液口和排液口,確保無(wú)氣泡產(chǎn)生。如有必要,可拆開(kāi)泵體進(jìn)行清洗和排氣。


    檢測器相關(guān)因素


    01


    檢測器波長(cháng)設置不當:



      • 原因:如果檢測器的波長(cháng)沒(méi)有設置在樣品的最大吸收波長(cháng)處,會(huì )導致基線(xiàn)不穩定。

      • 解決方法:將探測器的測試波長(cháng)調整到樣品的最大吸收波長(cháng)處。

    02


    檢測器污染:



      • 原因:長(cháng)期使用后,檢測器內部可能會(huì )積累污染物,影響基線(xiàn)穩定性。

      • 解決方法:定期清洗檢測器,去除污染物??梢允褂眉状蓟蚱渌麖?span id="m8m40mm" class="">極性溶劑進(jìn)行沖洗。


    其他因素


    01


    柱溫波動(dòng):



      • 原因:柱溫的微小變化都可能引起基線(xiàn)的波動(dòng)。

      • 解決方法:控制好柱子和流動(dòng)相的溫度,在檢測器之前使用熱交換器來(lái)穩定溫度。

    02


    系統漏液:



      • 原因:系統中可能存在漏液點(diǎn),導致流動(dòng)相流失和基線(xiàn)不穩定。

      • 解決方法:檢查管路接頭是否松動(dòng)、泵是否漏液等,確保系統密封性良好。

    綜上所述,高效液相色譜基線(xiàn)不穩定可能由多種因素導致。在解決問(wèn)題時(shí),需要綜合考慮色譜柱、流動(dòng)相、泵、檢測器以及系統其他部分的狀況,并采取相應的措施進(jìn)行調整和優(yōu)化。


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