液相色譜柱的平時(shí)使用要注意以下事項:
1.過(guò)濾流動(dòng)相和樣品:流動(dòng)相一般由水或緩沖溶液和有機溶劑混合而成,所有通過(guò)色譜柱的流動(dòng)相都需要進(jìn)行過(guò)濾。當流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí),過(guò)濾是必須的。所配制的樣品在注入流路系統前都需要經(jīng)過(guò)0.45μm(更好的是0.22μm)的濾膜過(guò)濾。需要注意區分水系和油系,它們不能混合使用,以免濾膜溶解引起污染。
2.防止機械震動(dòng):強烈的機械震動(dòng)可能導致柱床出現間隙,因此需要采取預防措施。
3.避免壓力和溫度突然變化:突然的溫度變化或者讓色譜柱從高處掉落可能會(huì )影響填料狀態(tài),急劇提高或降低柱壓也會(huì )影響填料。在調整流速時(shí)要緩慢操作,在閥門(mén)進(jìn)樣時(shí)轉動(dòng)不能太快。使用柱溫控制裝置時(shí),要等通入流動(dòng)相后才能升溫,應注意避免突變。
4.使用流動(dòng)相需注意如下事項:必須逐漸調整溶劑組成,特別是在反相色譜中,不可直接由有機溶劑轉為純水,同樣也不應反過(guò)來(lái)。需選擇合適的流動(dòng)相,以避免對固定相造成損壞。
5.柱子的維護很重要。如果儀器用于常規分析,樣品種類(lèi)有限但分析次數頻繁,可以考慮為每類(lèi)常規分析配置專(zhuān)用柱子,這有助于延長(cháng)柱子的使用壽命。一般來(lái)說(shuō),色譜柱不宜反沖。只有當生產(chǎn)商明確指出某柱可進(jìn)行反沖以去除柱頭附著(zhù)的雜質(zhì)時(shí),才能安全地進(jìn)行反沖操作。否則,反沖可能會(huì )迅速降低柱子的分離效果。
6. 定期清洗柱子:當色譜柱出現堵塞或分離效果下降時(shí),可以嘗試使用適當的溶劑進(jìn)行清洗。清洗溶劑的選擇應根據色譜柱的材質(zhì)和用途來(lái)確定,清洗時(shí)需注意流速和壓力,避免對柱子造成損害。
7. 保持色譜柱的干燥:在不使用色譜柱時(shí),應將其保存在干燥的環(huán)境中,以防止水分和雜質(zhì)對柱子造成損害。如果色譜柱需要長(cháng)期保存,可以考慮使用適當的保存劑進(jìn)行封存。
8. 定期檢查柱子的性能:對于頻繁使用的色譜柱,應定期檢查其性能,如分離效果、壓力降等。如果發(fā)現性能下降,應及時(shí)采取措施進(jìn)行維護或更換。
9. 注意樣品的濃度和體積:高濃度或大量的樣品可能會(huì )對色譜柱造成過(guò)載,影響分離效果。因此,在進(jìn)樣時(shí)應注意控制樣品的濃度和體積,確保其在色譜柱的承受范圍內。
10. 遵循操作規程:在使用液相色譜柱時(shí),應嚴格遵循操作規程,如正確安裝和拆卸柱子、調整流速和壓力等。任何不當的操作都可能對色譜柱造成損害,影響其使用壽命和分離效果。
以上是關(guān)于液相色譜柱日常使用需要注意的詳細事項。只有正確地使用和維護色譜柱,才能確保其在實(shí)驗中的準確性和可靠性,延長(cháng)其使用壽命。