手性色譜柱是一種利用高效液相色譜技術(shù)實(shí)現手性分離的方法,主要包括液相色譜、超高效液相色譜、毛細管電色譜等不同模式。它能夠有效地分離不對稱(chēng)分子的鏡像異構體,以其高效、準確和可靠的特點(diǎn)成為分離光學(xué)異構體的首選方法。手性色譜柱的分離原理是基于其固定的手性選擇性試劑提供各種手性選擇性,從而實(shí)現手性化合物的區別。使用手性色譜柱可能會(huì )遇到的問(wèn)題包括:
1、柱壓增高,則正手性色譜柱效果會(huì )提升
高壓產(chǎn)生的原因可能是因為流動(dòng)相中醇含量過(guò)高,或者液相通路被堵塞,或者柱頭有樣品析出,或者填料受到高壓壓縮導致柱頭下陷等。針對不同原因,應該采取具有針對性的對策。如果是因為流動(dòng)相中醇含量過(guò)高,則應該升高溫度或減慢流速。若液相通路被堵塞,則需要清除堵塞物。若柱頭有樣品析出,則應使用流動(dòng)相溶解樣品并對樣品進(jìn)行預處理以去除易析出的成分。如果填料被高壓壓縮導致柱頭下陷,則需重新購買(mǎi)新設備。
2、手性分離色譜柱圖中不同異構體的分離效果降低
色譜分離度降低的原因可能是由于色譜柱外部條件發(fā)生變化,或者柱子受到損害影響柱效。首先要查看是否由于溫度、溶液成分等外部因素的變化導致分離效果下降,若排除了各種外部因素,則可能是柱效降低導致的。如果分離度在短時(shí)間內急劇下降并伴隨柱壓升高,可能是由于強極性溶劑損害了柱子;如果分離度在長(cháng)時(shí)間內緩慢下降,可能是柱頭受到污染或壓縮,需要更換防護柱或者更換色譜柱。
手性色譜柱是由具有光學(xué)活性的單體固定在硅膠或其他聚合物上制成的,形成手性固定相。引入手性環(huán)境可以使對映異構體展現物理特征上的差異,從而實(shí)現光學(xué)異構體的分離。