液相色譜柱通常由柱管、端蓋、卡套(密封圈)、濾片(篩板)、接頭和螺絲等部件組成。柱管常用不銹鋼制成,當壓力不超過(guò)70Kg/cm2時(shí),也可選擇厚壁玻璃或石英管。此外,管內壁應具備高度的光潔度,以提高柱效,減小管壁效應,因此不銹鋼柱內壁經(jīng)常經(jīng)過(guò)拋光處理。
液相色譜柱日常使用保養:
1.采用預柱保護來(lái)分析柱子(硅膠在極性溶液/離子流動(dòng)溶液中有適度的溶解性)。
2·請注意色譜柱的 pH 范圍,大部分反相色譜柱的 pH 穩定范圍為 2 到 8。
3·避免組成物質(zhì)的流動(dòng)和極性大幅變化。
4·使用高效液相色譜試劑時(shí),必須在使用流動(dòng)相前對其進(jìn)行脫氣和過(guò)濾處理。
5·使用帶電性或離子性緩沖液作為流動(dòng)相時(shí),在實(shí)驗結束后應該清洗柱子并儲存在乙腈中。
6·提高壓力是更換減壓閥的表現。
7·請確定緩沖鹽在流動(dòng)相中的溶解性。
8·請確認樣品在移動(dòng)相中的溶解性。
9·避免突如其來(lái)的壓力。
液相色譜柱保存:
1.色譜柱實(shí)驗后的維護:
首先使用含鹽緩沖液或流動(dòng)相,隨后使用10%甲醇/水混合液洗滌30分鐘,清洗掉柱子里的鹽分,接著(zhù)用純甲醇再沖洗30分鐘。請注意:切勿使用純凈水來(lái)沖洗填料柱,應向水中添加10%甲醇,以防填料坍塌。
2.延長(cháng)色譜柱的保存時(shí)間:
為了長(cháng)時(shí)間保存色譜柱,需要儲存在適當的溶劑中。反相柱可放置在純甲醇或乙腈中,正相柱則應存放在脫水后的純正己烷中。離子交換柱應置于含防腐劑和硫柳汞的水中,并堵塞插頭后存放在室溫下。
液相色譜柱在使用之前,需要對柱進(jìn)行性能測試,并將結果記錄下來(lái),以便將來(lái)評估柱性能的變化。在進(jìn)行柱性能測試時(shí),必須按照色譜柱出廠(chǎng)報告中提供的條件進(jìn)行(出廠(chǎng)測試時(shí)使用的是最佳條件),只有這樣,測試結果才具有可比性。但需要注意:柱性能可能會(huì )受到使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件不同的影響。