液相色譜柱七大雷區，千萬(wàn)注意不要踩！

欄目：行業(yè)資訊發(fā)布時(shí)間：2024-03-18

色譜柱在色譜儀分析系統中起著(zhù)分離作用，是色譜分析的核心部件。正確使用和維護色譜柱尤為重要，使用不當就會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。如何才能夠避免使用不當的“雷區”呢，那就從以下七個(gè)方面簡(jiǎn)單介紹液相色譜柱在使用過(guò)程中應當著(zhù)重注意的問(wèn)題。

禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱

避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。

想要了解更多樣品預處理問(wèn)題，點(diǎn)擊藍色字體查看詳解：液相色譜樣品預處理的注意事項，你都知道嗎？

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避免壓力和溫度的急劇變化

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行，以保持色譜柱內填料的穩定性。

避免直接改變溶劑的組成

在需要改變檢測樣品溶液組成是，應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然。且在使用次洗脫能力強的洗脫液沖洗色譜柱時(shí)，對流路系統中流動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50~75ml。

避免流動(dòng)相使用不當而破壞固定相

選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠"飽和"，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

避免色譜柱反沖

一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖，只有色譜柱使用說(shuō)明書(shū)上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則，反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。

想要了解更多色譜柱反沖問(wèn)題，點(diǎn)擊藍色字體查看詳解：干貨 | 手性色譜柱可以反沖嗎？

禁止將緩沖溶液長(cháng)時(shí)間存放在色譜柱內

保存色譜柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。

禁止使用完緩沖溶液不沖洗處理

色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線(xiàn)平衡；當采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí)，使用完后應用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗；含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會(huì )腐蝕不銹鋼管道，不宜長(cháng)期與之接觸；裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用，應每隔4-5天開(kāi)機沖洗15分鐘。

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