手性sfc流動(dòng)相的配制與選擇

　　手性sfc流動(dòng)相的配制與選擇。手性SFC的柱壓降大（比毛細管色譜大30倍），對分離有影響（柱前端與柱尾端分配系數相差很大，產(chǎn)生壓力效應）；超臨界流體的密度受壓力在臨界壓力處最大，超過(guò)該點(diǎn)，影響小，超過(guò)臨界壓力20%，柱壓降對分離的影響??；

　　一、流動(dòng)相的配制：

　　液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：

　　a、流動(dòng)相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì )沉淀在柱中(或長(cháng)時(shí)間保留在柱中)。

　　b、流動(dòng)相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(特殊情況除外)。

　　c、流動(dòng)相的黏度要盡量小，以便在使用較長(cháng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果；同時(shí)降低柱壓降，延長(cháng)液體泵的使用壽命(可運用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。

　　d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應。如使用UV檢測器，使用對紫外吸收較低的溶劑配制。

　　e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導致實(shí)驗無(wú)法進(jìn)行。

　　f、在流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。

　　二、流動(dòng)相流速的選擇：

　　因柱效是柱中流動(dòng)相線(xiàn)性流速的函數，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求最佳柱效，使用最佳流速。對內徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml／min，對于內徑為4.0mm柱，流速0.8ml／min為佳。

　　當選用最佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(cháng)?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí)，可適當增加甲醇或乙腈的含量)。

　　在使用HPLC級溶劑配制流動(dòng)相，使用合適的流動(dòng)相可延長(cháng)色譜柱的使用壽命，提高柱性能。