蛋白質(zhì)的分離純化要怎么做呢？有什么方法呢？

　　蛋白質(zhì)的分離純化要怎么做呢？有什么方法呢？蛋白質(zhì)是一種大分子物質(zhì),并且不同蛋白質(zhì)的分子大小不同,因此可以利用一些較簡(jiǎn)單的方法使蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)分開(kāi),并使蛋白質(zhì)混合物也得到分離。根據蛋白質(zhì)分子大小不同進(jìn)行分離的方法主要有透析、超濾、離心和凝膠過(guò)濾等。透析和超濾是分離蛋白質(zhì)時(shí)常用的方法。透析是將待分離的混合物放入半透膜制成的透析袋中,再浸入透析液進(jìn)行分離。

　　超濾是利用離心力或壓力強行使水和其它小分子通過(guò)半透膜,而蛋白質(zhì)被截留在半透膜上的過(guò)程。這兩種方法都可以將蛋白質(zhì)大分子與以無(wú)機鹽為主的小分子分開(kāi)。它們經(jīng)常和鹽析、鹽溶方法聯(lián)合使用,在進(jìn)行鹽析或鹽溶后可以利用這兩種方法除去引入的無(wú)機鹽。由于超濾過(guò)程中,濾膜表面容易被吸附的蛋白質(zhì)堵塞,以致超濾速度減慢,截流物質(zhì)的分子量也越來(lái)越小。所以在使用超濾方法時(shí)要選擇合適的濾膜,也可以選擇切向流過(guò)濾得到更理想的效果。

　　溶解度不同進(jìn)行分離純化:

　　影響蛋白質(zhì)溶解度的外部條件有很多,比如溶液的pH值、離子強度、介電常數和溫度等。但在同一條件下,不同的蛋白質(zhì)因其分子結構的不同而有不同的溶解度,根據蛋白質(zhì)分子結構的特點(diǎn),適當地改變外部條件,就可以選擇性地控制蛋白質(zhì)混合物中某一成分的溶解度,達到分離純化蛋白質(zhì)的目的。常用的方法有等電點(diǎn)沉淀和pH值調節、蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析、有機溶劑法、雙水相萃取法、反膠團萃取法等。

　　電荷不同進(jìn)行分離純化:

　　根據蛋白質(zhì)的電荷即酸堿性質(zhì)不同分離蛋白質(zhì)的方法有電泳和離子交換層析兩類(lèi)。

　　親和力進(jìn)行分離純化:

　　親和層析是利用蛋白質(zhì)分子對其配體分子特有的識別能力(即生物學(xué)親和力)建立起來(lái)的一種有效的純化方法。它通常只需一步處理即可將目的蛋白質(zhì)從復雜的混合物中分離出來(lái),并且純度相當高。