色譜柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會(huì )降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,如果色譜柱堵住了,可以參考以前幾方面。
1、色譜柱“堵”的表現
“堵”的表現現象就是柱壓異常升高,直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端,最主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì),雜質(zhì)的主要來(lái)源就是細菌。
2、色譜柱“堵”的原因分析
原因1:配制流動(dòng)相時(shí)細菌污染
首先我們要認識到,一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過(guò)濾處理,直接使用沒(méi)有問(wèn)題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì),也能在液相流路系統最前端的過(guò)濾頭上排除,真正容易引起問(wèn)題的,是水中的細菌。
新制備的純水在室內放置幾天就會(huì )長(cháng)菌,而這些細菌雖然肉眼不可見(jiàn),卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報廢。這就是在配制流動(dòng)相時(shí)造成的細菌污染的原因,解決它的方法很簡(jiǎn)單,就是確保水的可靠性。
這里有兩種方式推薦:
?。?)最理想的方式當然是購買(mǎi)實(shí)驗室專(zhuān)用純水機,既方便又可靠,質(zhì)量也放心。唯一的缺點(diǎn)就是價(jià)格不菲。
?。?)成箱購買(mǎi)市售品牌純凈水,這些水的質(zhì)量足以應付液相色譜的要求。先隨機抽取一支做一下細菌平板實(shí)驗,待菌落數合格方可使用。