破解HPLC色譜峰面積重現性差難題

在使用高效液相（HPLC)色譜系統進(jìn)行日常分析檢測的過(guò)程中，有時(shí)會(huì )遇到色譜峰峰面積重現性差的問(wèn)題，導致無(wú)法對組分進(jìn)行準確定量。

重現性是指不同分析人員或不同實(shí)驗室在各自的條件下所得分析結果的精密度，即使是給到了相同的開(kāi)發(fā)方法也會(huì )有方法不重現的時(shí)候，這是什么原因呢？可以從色譜柱、儀器系統、方法本身的穩定性這三方面去排查。

首先檢查色譜柱的性能是否完好，觀(guān)察色譜峰形和柱效變化情況，確認色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染，可以使用更強的洗脫溶劑沖洗色譜柱。

如果是由于更換色譜柱導致方法不能重現，那么就是色譜柱間的差異問(wèn)題，同一種鍵合相，不同廠(chǎng)家的會(huì )不一樣，同一廠(chǎng)家的也有很多款，即使同一款色譜柱，還有批次差異問(wèn)題。但一般情況下，同一款色譜柱，批次差異都是比較小的。

2）流動(dòng)相的pH與待分析物的pKa接近。

3）對流動(dòng)相比例敏感，盡量使用同一臺儀器，或者流動(dòng)相預混并記錄好具體混合方法，包括試劑的添加順序，甚至記錄量取時(shí)的試劑溫度。

4）緩沖溶液的pH須在加入有機相前進(jìn)行調節。

高效液相色譜方法重現性好是確保分析結果可靠性的關(guān)鍵因素?？梢酝ㄟ^(guò)色譜柱、儀器系統、方法本身的穩定性這三方面去排查和優(yōu)化，有效提升HPLC色譜峰面積的重現性，為科研和生產(chǎn)提供更加準確、可靠的分析數據支持。