通用反相液相色譜柱的結構:
空柱由柱連接件、柱管和濾片組成。
柱接頭采用低死體積設計,由兩端螺紋組件組成。一端為7/16英寸外螺紋,另一端為3/16英寸內螺紋。7/16英寸外螺紋與1/4英寸(Φ6.35mm)柱管連接,并在中間置入壓環(huán)以實(shí)現密封。3/16英寸內螺紋則與1/16英寸(Φ1.57mm)連接管相連,中間同樣放置壓環(huán)進(jìn)行密封。為減少柱外死體積,安裝色譜柱時(shí),應將Φ1.57mm連接管通過(guò)空心螺釘壓環(huán)盡量插到底部,然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)在空心螺釘的擠壓下變形,從而緊緊固定在連接管上(連接管通過(guò)壓環(huán)后露出的部分長(cháng)度需嚴格控制在2.5mm或其他指定尺寸內)。
在兩端的柱接頭內,柱管的兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),用于防止柱填料因流動(dòng)相的沖擊而泄漏。整個(gè)空柱的組件均采用316#不銹鋼材質(zhì),能夠耐受一般溶劑的作用。然而,由于含氯化物的溶劑對不銹鋼有一定的腐蝕性,因此在使用時(shí)需特別注意,避免在柱及連接管內長(cháng)時(shí)間存放這種溶劑,以防止腐蝕的發(fā)生。
通用反相液相色譜柱的安裝方法:
1、打開(kāi)柱子包裝盒,檢查色譜柱的型號、規格、生產(chǎn)日期及內部存儲的溶劑。
2、將柱兩端接頭的密封堵頭卸下,并放回包裝盒以備后用。
3、根據柱管上指示的流動(dòng)相方向,將色譜柱的入口通過(guò)連接管與進(jìn)樣閥的出口相連(如果條件允許,建議在柱前使用保護柱);柱的出口應連接至檢測器。所用連接管為外徑1.57mm、內徑0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端配有空心螺釘和密封用的壓環(huán)。在連接時(shí)一定要盡量減少柱外的死體積。連接管在通過(guò)空心螺釘和壓環(huán)時(shí)要插到底,然后順時(shí)針?lè )较驍Q緊空心螺釘,直到無(wú)法再擰動(dòng)為止。接著(zhù),用扳手進(jìn)一步順時(shí)針擰動(dòng)1/4至1/2圈,注意不要用力過(guò)大。如果色譜柱在流動(dòng)相加壓后出現漏液現象,請繼續用扳手順時(shí)針擰動(dòng)1/4圈,直至不再漏液為止。
4、連接完成后,對整個(gè)液相色譜系統進(jìn)行壓力測試。首先,緩慢地開(kāi)啟泵,以較低的流速(如0.2ml/min)讓流動(dòng)相通過(guò)色譜柱,觀(guān)察是否有異常聲音或明顯的壓力波動(dòng)。若一切正常,可逐步增加流速至工作流速,再次檢查系統穩定性及柱子的密封性。
5、在進(jìn)行正式分析前,需對色譜柱進(jìn)行平衡。根據待測樣品所需的流動(dòng)相組成,配制好流動(dòng)相并過(guò)濾脫氣后,以適當的流速沖洗色譜柱,直至基線(xiàn)穩定,無(wú)明顯波動(dòng)。此過(guò)程有助于去除柱子中可能殘留的雜質(zhì),確保分析結果的準確性。
6、安裝并調試完成后,啟動(dòng)數據采集軟件,設置合適的檢測參數,如波長(cháng)、采樣頻率等,準備進(jìn)行樣品分析。同時(shí),記錄下色譜柱的安裝日期、使用條件及每次使用后的維護情況,以便追蹤色譜柱的性能變化,及時(shí)采取必要的維護措施,延長(cháng)其使用壽命。
7、最后,切記在完成分析任務(wù)后,及時(shí)清洗色譜柱,避免殘留物對柱子造成損害。根據使用的流動(dòng)相類(lèi)型,選擇合適的清洗溶劑,按照制造商推薦的清洗程序進(jìn)行操作,確保色譜柱處于最佳狀態(tài),為下一次分析做好準備。