液相色譜柱的柱壓升高可能引起的幾種原因

液相色譜柱的儲存液若無(wú)特別說(shuō)明，一般為評價(jià)報告中所列的流動(dòng)相。在使用前，務(wù)必確認儲存液與待分析樣品的流動(dòng)相是否能夠互溶。在反相色譜中，若使用高濃度的鹽或緩沖液作為洗脫劑，應先用約10%的低濃度有機相洗脫劑進(jìn)行過(guò)渡，避免緩沖液中的鹽在高濃度有機相中析出，從而堵塞色譜柱。

液相色譜柱的幾種原因可能導致柱壓升高。

1、流動(dòng)相的預處理

雜質(zhì)堵塞了色譜柱的入口濾片，導致壓力增加。這通常是因為流動(dòng)相沒(méi)有經(jīng)過(guò)過(guò)濾，或盡管已經(jīng)進(jìn)行了過(guò)濾，但過(guò)濾效果不夠，導致固體雜質(zhì)滯留在濾板上。

2、樣品的沉淀

當樣品的溶劑與流動(dòng)相不匹配時(shí)，樣品進(jìn)入色譜柱后，有時(shí)會(huì )因為溶解度降低而出現沉淀，從而導致壓力升高。

3、晶體的析出

在使用含緩沖液的流動(dòng)相時(shí)，緩沖液中的無(wú)機鹽可能會(huì )在體系中留下殘余。這些無(wú)機鹽由于在新流動(dòng)相中的溶解度降低而會(huì )析出，從而導致流體阻力增加和壓力升高。

4、細菌或霉菌滋生

霉菌可能在流動(dòng)相、管道或柱子入口處滋生并繁殖，進(jìn)而阻塞濾板，導致壓力升高。因此，使用磷酸鹽緩沖液時(shí)通常建議現配現用。

5、溶質(zhì)吸附

當溶質(zhì)在柱子上被強烈吸附，并且所用的流動(dòng)相難以將其洗脫時(shí)，未被洗脫的溶質(zhì)累積會(huì )導致阻力增加和壓力上升。

6、流動(dòng)相更換的速度過(guò)于頻繁

在改變流動(dòng)相體系時(shí)，不同性質(zhì)且互不混溶的流動(dòng)相的替換，會(huì )導致它們共存于同一體系中，從而引起壓力升高。

7、壓力脈沖

在運行過(guò)程中，有時(shí)會(huì )出現系統內壓力的突然波動(dòng)。這種壓力脈沖可能導致多孔填料的破損和柱床結構的細微變化，而填料微屑的長(cháng)期積累也可能導致柱床阻力增加，從而使壓力上升。

針對上述導致液相色譜柱柱壓升高的原因，我們可以采取一系列預防與解決措施來(lái)確保色譜柱的正常運行和延長(cháng)其使用壽命。

首先，加強流動(dòng)相的預處理至關(guān)重要。應確保所有流動(dòng)相在使用前均經(jīng)過(guò)適當過(guò)濾，推薦使用高質(zhì)量的濾膜，如0.45μm或更小的孔徑，以有效去除雜質(zhì)。同時(shí)，定期檢查并更換過(guò)濾器，防止因長(cháng)期使用而降低過(guò)濾效率。

其次，針對樣品的沉淀問(wèn)題，應在進(jìn)樣前對樣品進(jìn)行預處理，如稀釋、調整溶劑或使用適當的樣品前處理技術(shù)，以確保樣品與流動(dòng)相兼容，減少沉淀生成。此外，選擇合適的溶劑清洗色譜柱，以去除可能殘留的沉淀物。

對于晶體析出的情況，除了使用新鮮配制的緩沖液外，還可以考慮在流動(dòng)相中加入適量的添加劑，如有機溶劑或表面活性劑，以提高無(wú)機鹽的溶解度，減少析出風(fēng)險。

在防止細菌或霉菌滋生方面，保持系統清潔干燥是關(guān)鍵。定期對色譜系統進(jìn)行清洗和消毒，使用無(wú)菌的流動(dòng)相和容器，避免在長(cháng)時(shí)間不使用時(shí)將流動(dòng)相留在系統中。

針對溶質(zhì)吸附問(wèn)題，可以嘗試優(yōu)化流動(dòng)相組成，使用更強的洗脫劑或改變洗脫條件，以確保溶質(zhì)能被有效洗脫。此外，選擇合適的色譜柱和填料類(lèi)型，根據分析物的性質(zhì)進(jìn)行匹配，也能減少吸附現象。

最后，在更換流動(dòng)相時(shí)，應緩慢過(guò)渡，避免直接切換，以減少不同流動(dòng)相之間的相互作用和壓力波動(dòng)。同時(shí)，定期檢查色譜系統的密封性和穩定性，及時(shí)發(fā)現并解決潛在問(wèn)題，如泄漏、堵塞等，確保系統穩定運行。通過(guò)這些措施的綜合應用，我們可以有效降低液相色譜柱柱壓升高的風(fēng)險，提高分析結果的準確性和可靠性。