液相色譜柱的柱壓升高是哪些原因造成？

液相色譜柱的儲存液若無(wú)特別說(shuō)明，均為評價(jià)報告中所列的流動(dòng)相。在使用之前，務(wù)必確認儲存液與待分析樣品的流動(dòng)相是否能夠互溶。在反相色譜的操作中，如果使用高濃度的鹽或緩沖液作為洗脫劑，建議先用約10%的低濃度有機相洗脫劑進(jìn)行過(guò)渡，否則緩沖液中的鹽分在高濃度有機相中可能會(huì )析出，導致色譜柱堵塞。

液相色譜柱的柱壓升高可能由以下幾種原因引起。

1、流動(dòng)相的預處理

雜質(zhì)堵塞了色譜柱的進(jìn)水濾片，導致壓力增加。這通常是因為流動(dòng)相沒(méi)有經(jīng)過(guò)過(guò)濾，或者雖然經(jīng)過(guò)過(guò)濾，但過(guò)濾效果不佳，從而使固體雜質(zhì)滯留在濾板上。

2、樣品的沉淀

當溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí)，樣品進(jìn)入色譜柱時(shí)，可能因為溶解度下降而發(fā)生沉淀，導致壓力升高。

3、晶體的析出

在使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí)，緩沖液中的無(wú)機鹽可能會(huì )在系統內殘留。這些無(wú)機鹽在新流動(dòng)相中的溶解度降低，可能會(huì )析出，從而導致流體阻力增加和壓力升高。

4、細菌或霉菌滋生

霉菌會(huì )在流動(dòng)相、管道或柱子入口處滋生，導致濾板被堵塞，從而使壓力升高。因此，使用磷酸鹽緩沖液時(shí)通常需要現配現用。

5、溶質(zhì)吸附

當溶質(zhì)在柱子上被強烈吸附，并且所使用的流動(dòng)相難以將其洗脫時(shí)，累積的未洗脫溶質(zhì)會(huì )導致阻力增加和壓力升高。

6、流動(dòng)相更換的頻率過(guò)高。

當流動(dòng)相體系發(fā)生變化時(shí)，不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相可能會(huì )出現在同一體系中，這也可能導致壓力升高。

7、壓力脈沖

在運行過(guò)程中，系統內的壓力有時(shí)會(huì )出現突然的波動(dòng)。這種壓力脈沖可能會(huì )導致多孔填料的破損以及柱床結構的細微變化。同時(shí)，填料微屑的長(cháng)期積累也可能增加柱床的阻力，從而引起壓力的升高。