色譜儀中出現“鬼峰”可能是由于多種原因引起的,在這里列舉了一些主要的原因及相應的排除方法:
1.進(jìn)樣針受污染:如果進(jìn)行連續進(jìn)樣,在某個(gè)位置出現忽高忽低的峰,最可能是因為進(jìn)樣針受到污染。這種情況下應當清洗進(jìn)樣針,留意黑垢的干擾,一些樣品容易殘留在針管內,可重新取樣進(jìn)行分析。
2.污染排放量的管控:采取與前述相同的處理方法。
3.樣品中有未知成分:改良樣品的預處理方法。
4.流動(dòng)相污染:流動(dòng)相中的污染物可能會(huì )逐漸聚集到色譜柱上,導致保留時(shí)間的偏移。這時(shí)應當更換新的流動(dòng)相,盡量現場(chǎng)現配,隔夜后再次使用時(shí)應過(guò)濾,并力求使用HPLC級別的試劑。
5.柱切換問(wèn)題:如果在檢測的固定位置出現了小的峰值,很可能是由于柱切換引起的。
6.可能是由于檢測器設置不當、進(jìn)樣量過(guò)大或樣品濃度過(guò)高,導致出現平頂峰。
7.管路中存在小氣泡:打開(kāi)排氣閥,提高流速以排除。
8.在流動(dòng)相中添加少量的添加劑,比如離子對試劑等,需要相當長(cháng)的時(shí)間來(lái)使色譜柱達到平衡。通常,需要10到20個(gè)柱體積的流動(dòng)相來(lái)進(jìn)行平衡。
9. 色譜柱老化:色譜柱使用時(shí)間過(guò)長(cháng),或者經(jīng)常使用在惡劣的條件下,可能會(huì )導致色譜柱性能下降,進(jìn)而出現“鬼峰”。此時(shí),應當考慮更換新的色譜柱。
10. 儀器系統問(wèn)題:如果色譜儀系統存在問(wèn)題,比如泵的壓力不穩定,或者溫度控制系統失效,也可能導致“鬼峰”的出現。此時(shí),應當對儀器進(jìn)行全面的檢查和維護。
11. 樣品前處理不當:樣品的前處理過(guò)程,如過(guò)濾、稀釋、離心等,如果操作不當,可能會(huì )引入雜質(zhì),進(jìn)而在色譜儀中產(chǎn)生“鬼峰”。因此,樣品的前處理過(guò)程需要嚴格遵循操作規程。
12. 流動(dòng)相配比問(wèn)題:流動(dòng)相的配比也會(huì )影響色譜儀的檢測結果。如果流動(dòng)相的配比不正確,可能會(huì )導致某些成分在色譜柱上不能得到良好的分離,進(jìn)而產(chǎn)生“鬼峰”。此時(shí),應當重新調整流動(dòng)相的配比。
在排除“鬼峰”的過(guò)程中,我們需要注意保持耐心和細心,對可能的原因進(jìn)行逐一排查,確保找到正確的解決方法。同時(shí),我們也需要定期對色譜儀進(jìn)行維護和保養,以保證其長(cháng)期的穩定運行。