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流動(dòng)相溶劑瓶的保養 溶劑瓶是流動(dòng)相的起點(diǎn),通常是盛放水相溶液或是有機相溶液。 水相溶液 有機相溶液 清洗過(guò)濾 高壓泵的保養 泵是液相色譜的核心,泵將流動(dòng)相從溶劑瓶輸送到液相流路系統中,并要在高壓下保持流量和壓力的穩定。狀態(tài)正常的高壓泵是液相色譜準確分析的基礎,所以平日一定要重視對泵的維護。 泵壓力波動(dòng) 很多情況下,泵的問(wèn)題反映在壓力上,壓力波動(dòng)又是常見(jiàn)的一類(lèi)問(wèn)題。通常我們可以通過(guò)重新清洗流路和再次脫氣流動(dòng)相加以解決。 過(guò)濾頭保養 在泵的維護里還有一項常做的工作就是更換清洗閥上的過(guò)濾頭,通常判斷的標準是純水以5mL/min流速清洗的時(shí)候,如果壓力超過(guò)1MPa則考慮更換。 進(jìn)樣器的保養 進(jìn)樣器分手動(dòng)和自動(dòng)兩大類(lèi),雖然兩者工作模式不同,但使用的要點(diǎn)是基本一致的。 圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò ),侵刪 防止交叉污染 自動(dòng)進(jìn)樣器常見(jiàn)的問(wèn)題是交叉污染,交叉污染產(chǎn)生的原因很直接,樣品殘留在進(jìn)樣針內外表面,并隨下一次進(jìn)樣進(jìn)入色譜系統。要解決交叉污染,主要靠清洗。 精細操作 手動(dòng)進(jìn)樣器的操作要點(diǎn)大致相同,應使用液相色譜專(zhuān)用進(jìn)樣針,進(jìn)樣時(shí)插針應插到底,不使用時(shí)將針頭留在進(jìn)樣器內,使用前后都要及時(shí)清洗。 色譜柱的保養 色譜柱是化合物分離的關(guān)鍵。保養良好的色譜柱具有很高的塔板數,且儀器基線(xiàn)平穩。 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng) 溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料,因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩(如前所述)。 應逐漸改變溶劑的組成 特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/span> 選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH) 以此避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。 對樣品進(jìn)行預處理或使用保護柱 避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。 檢測器的保養 光源部分檢測器 光源部分檢測器中非常重要的部件是光源,光源對發(fā)射能量有要求,一旦能量衰減到一定程度,就會(huì )出現基線(xiàn)噪聲變大,靈敏度降低等一系列影響使用的問(wèn)題,因此光源是一個(gè)消耗品。通常紫外燈的壽命是2000h,當到達這個(gè)時(shí)限的時(shí)候,我們就要特別關(guān)注燈的能量狀況,可以通過(guò)儀器維護軟件中自帶的“燈能量測試”功能來(lái)判斷,測試的結果會(huì )分別評估低、中、高三個(gè)波長(cháng)段的能量,一旦某個(gè)波長(cháng)段的測試結果顯示失敗,就表示需要更換燈。 檢測池檢測器 檢測池檢測器中另一個(gè)重要部件是檢測池,也叫流通池。通常大家關(guān)心的一個(gè)問(wèn)題是檢測池被堵掉,因為檢測池通常不是很耐壓,所以一旦被堵就很可能造成損壞。事實(shí)上檢測池通常不太容易被堵,原因是幾乎所有的顆粒雜質(zhì)都會(huì )被色譜柱攔下了,所以堵塞檢測器的東西基本都不是來(lái)自樣品的,很可能是后來(lái)“產(chǎn)生”的,比如含鹽流動(dòng)相殘留在檢測池中導致鹽析出。 廢液的處置 HPLC的廢液大部分含有有機溶劑,會(huì )對人體產(chǎn)生一定的危害,對環(huán)境也會(huì )產(chǎn)生污染,嚴禁隨意傾倒,應及時(shí)處理。目前,國內大部分實(shí)驗室是將廢液送到專(zhuān)門(mén)的廢液處理站集中進(jìn)行無(wú)害化處理。