干貨 | HPLC峰型問(wèn)題之肩峰原因分析

肩峰指的是在流出曲線(xiàn)或吸收曲線(xiàn)的峰上出現的不成峰形的小曲折，形狀類(lèi)似肩膀，故稱(chēng)為肩峰。

肩峰

原因：進(jìn)樣量過(guò)大或是樣品濃度過(guò)高。

解決方法：減少進(jìn)樣量或稀釋樣品或換用尺寸更大、載樣量更高的色譜柱。

原因：樣品溶劑和初始比例流動(dòng)相的溶劑洗脫能力不同或溶解能力較差以及為了樣品的溶解性或穩定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，緩沖液的酸堿性可能會(huì )導致樣品轉化，從而導致肩峰現象。

解決方法：調整流動(dòng)相pH或配比；使用初始比例流動(dòng)相溶解樣品；使用溶劑效應消除器；更換緩沖液。

注意：樣品要現配現用，避免樣品溶解液的有機相比例、pH值發(fā)生變化而導致的溶劑效應

原因：樣品或者系統中存在同一時(shí)間出峰的雜質(zhì)，干擾主峰峰形。

解決方法：

1.排查雜質(zhì)干擾來(lái)源，判斷是由系統引入雜質(zhì)還是樣品引入雜質(zhì)。

2.若是系統引入雜質(zhì)，可以通過(guò)清洗流動(dòng)相過(guò)濾頭；清洗進(jìn)樣針；清洗液相管路；清洗或更換色譜柱、保護柱等。

3.若是樣品引入雜質(zhì)，可以通過(guò)優(yōu)化前處理方法，對于樣品進(jìn)行純化；選擇分離能力更強的色譜柱。

原因：流動(dòng)相或者進(jìn)樣溶劑中影響樣品，干擾主峰峰形

 解決方法：

1.排查流動(dòng)相及進(jìn)樣溶劑，判斷是流動(dòng)相的問(wèn)題還是進(jìn)樣溶劑的問(wèn)題。

2.若是流動(dòng)相的問(wèn)題，可以重新配置流動(dòng)相；是流動(dòng)相pH在化合物pKa±2范圍外。

3.若是進(jìn)樣溶劑的問(wèn)題，可以使用與初始比例流動(dòng)相相同的進(jìn)樣溶劑；使用溶劑效應消除器。

原因：由于色譜柱長(cháng)時(shí)間使用后，色譜柱出現坍塌或者、理論塔板數降低造成的。

解決方法：

1.驗證色譜柱塔板數，可根據色譜柱的檢測報告方法，測試其當前理論塔板數。

2.更換新的色譜柱。