色譜保留時(shí)間飄忽不定，如何破案？

液相色譜保留時(shí)間總是飄忽不定，令人難以琢磨。根據經(jīng)驗，色譜保留時(shí)間不重現分為兩種情況：一是保留時(shí)間單方向的漂移，即保留時(shí)間提前或延后；二是保留時(shí)間無(wú)規律的波動(dòng)，即保留時(shí)間忽前忽后。

介紹色譜保留時(shí)間漂移前，我們先來(lái)了解與區分保留時(shí)間、死時(shí)間、調整保留時(shí)間的概念：

調整保留時(shí)間=保留時(shí)間-死時(shí)間

※在實(shí)驗室條件下（溫度、固定相等）一定時(shí)，調整保留時(shí)間僅決定于組分的性質(zhì)，因此調整保留時(shí)間是定性的基本參數。

那液相色譜中保留時(shí)間為何忽前忽后呢？下面我們來(lái)說(shuō)說(shuō)主要的影響因素及“破案”方法。

若發(fā)生保留時(shí)間漂移，需要考慮流動(dòng)相是否已使色譜柱達到充分的平衡。一般情況下，流動(dòng)相平衡色譜柱需要10-20個(gè)柱體積；但如果流動(dòng)相中有使用弱酸、弱堿、緩沖鹽和離子對試劑，或者固定相為正相硅膠等，則需要更長(cháng)的時(shí)間來(lái)平衡色譜柱。

這時(shí)也可能會(huì )導致保留時(shí)間的漂移，需要同時(shí)觀(guān)察色譜峰型、柱效、壓力的變化情況，推測色譜柱是否被污染?？梢愿鶕唧w的測試條件來(lái)選擇適當的溶劑進(jìn)行色譜柱的沖洗，或更換新的色譜柱。為了延長(cháng)色譜柱的使用壽命，增加保護柱是非常有效的方法。

確認柱溫的準確性，柱溫的變化也會(huì )導致保留時(shí)間的變化。

流動(dòng)相中某種試劑的揮發(fā)，流動(dòng)相中不同試劑的比例配制有誤，也會(huì )導致保留時(shí)間的變化，需要確認流動(dòng)相是否新鮮與正確。

觀(guān)察柱前壓力，如果壓力不穩定或者偏離正常值，可能是泵流速不準確或者有氣泡產(chǎn)生，出現保留時(shí)間的不穩定，需要保證儀器流速的準確性與穩定性。

觀(guān)察系統壓力，如果幾次進(jìn)樣的壓力曲線(xiàn)不能重合或差別比較大，可能是系統存在泄露或堵塞，出現保留時(shí)間的不穩定，需要依次排查系統中有無(wú)漏液或堵塞異常。

保持保留時(shí)間的重復性是重中之重！同時(shí)，也要盡可能避免保留時(shí)間的漂移！關(guān)注保留時(shí)間的穩定性也能反映流動(dòng)相、檢測器等的正常情況！