氨基柱是一種可以同時(shí)用于正相和反相條件的色譜柱。但正相溶劑和反相溶劑不相互溶解,這一點(diǎn)不容忽視。對于新購買(mǎi)的柱子,請注意打開(kāi)分析測試說(shuō)明,了解柱子的保存溶劑。如果保存溶劑與您將要使用的流動(dòng)極性不同,則不會(huì )相互溶解,請首先使用異丙醇進(jìn)行過(guò)渡。在過(guò)渡過(guò)程中,注意異丙醇粘度高,會(huì )導致柱壓高,適當降低流速。如果流動(dòng)相中有緩沖鹽,首先使用不含緩沖鹽的同比流動(dòng)相過(guò)渡,以避免緩沖鹽的沉淀。
說(shuō)到氨基柱,我們熟悉的是拿它來(lái)做糖的分析。這是一個(gè)典型的例子。除了HILIC除模式外,氨基柱還可用作正相和弱陰離子交換兩種模式??梢哉f(shuō),應用范圍和模式都很廣。
說(shuō)了這么多,我們來(lái)看看氨基柱如何使用和維護。
如果使用新色譜柱HILIC模式,使用前請使用異丙醇小流速過(guò)夜平衡色譜柱。建議流速為0.1mL/min,然后轉換到100%乙腈沖洗20柱體積,再轉換到與流量相同比例的無(wú)鹽乙腈水系統沖洗20柱體積。
1.沖洗
用乙腈:水=色譜柱在60:40清洗時(shí),不建議水相比例超過(guò)40%,過(guò)度使用水相容易導致鍵合相水解。
2.色譜柱再生
當色譜柱長(cháng)期使用,柱效很低時(shí),可對色譜柱進(jìn)行再生處理,使用乙腈:水(水中加入0.05%氨水)=60:40條件沖洗30柱體積。
3.保存
保存一個(gè)月內,請使用與所選流動(dòng)相同的有機溶劑和水混合溶液(不含酸,無(wú)機鹽)更換,請避免只用水更換;長(cháng)期保存一個(gè)月以上,經(jīng)上述處理后,請用乙腈更換保存。