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  • 如何提高色譜柱柱效及老化的目的

    發(fā)布時(shí)間:2022-05-27

      色譜柱柱效是色譜柱對色譜中兩種物質(zhì)分離能力的大小,柱效越高,分離效果越好,峰形越好,反之則分離效果差,度峰形差,甚至不能完全分開(kāi)兩個(gè)物質(zhì),色譜柱的柱效和填料,柱問(wèn)長(cháng),柱內徑均有關(guān)系,一般來(lái)說(shuō),填料越細密,柱長(cháng)徑比越大,柱效越高。

      色譜柱的柱效能是評價(jià)色譜性能的一項重要指標,混合物能否在色譜柱中得到分離,除取決于選擇合適的固定相外,還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。

      不過(guò)在HPLC中,色譜柱柱效一般出廠(chǎng)后就基本固答定,隨著(zhù)使用過(guò)程的損耗而柱效降低,人工填柱的色譜柱,因為每次裝柱時(shí)所用的溶液,填料量都不盡相同,因此柱效也會(huì )有變化,測柱效主要是看柱是否具有良好的分離效果。

      在實(shí)際工作中,我們通過(guò)對載氣流速,進(jìn)樣技術(shù),氣化室溫度,色譜柱,柱溫,檢測器溫度這六個(gè)方面的選擇,有效地提高了柱效率,使分析出的色譜峰峰形正常,無(wú)峰形擴張,拖尾,峰漏檢等不良現象出現,分離度高,從而提高了分析結果的準確性。

      色譜柱所謂柱效就是在較短的時(shí)間內,用較短的柱子達到滿(mǎn)意的分析結果,為了提高色譜柱的柱效率,減少色譜峰擴張,拖尾及峰漏檢等現象.。

      裝填好的色譜柱還需要進(jìn)行老化處理后,才能接至檢測器使用,老化的目的有兩個(gè):(1)為了徹底除去固定相中殘余溶劑和某些揮發(fā)性雜質(zhì),確保檢測器不收污染,使之有較低的本底電流。

     ?。?)進(jìn)一步促使固定液均勻地,牢固地分布在載體表面上,可以提高柱效能,老化的方法是:把色譜柱接入載氣氣路系統(色譜柱為安全起見(jiàn),一般采用氮氣作載氣),色譜柱的一端接在汽化室上,另一端放空(不要接在檢測器上,防止沾污),用10——20ml/分的載氣流速,略高于操作溫度10°C—20°C(但要低于固定液的最高使用溫度極限)的條件下,通氣4—8h甚至24h,基本老化好后,再接上檢測器檢查,當記錄儀基線(xiàn)平直以后,老化過(guò)程才算結束,千萬(wàn)注意,上述老化色譜柱的接法,不適用于以氫氣作載氣老化,否則氫氣放空在色譜爐中易發(fā)生爆炸事故。

      廣州研創(chuàng )是國內專(zhuān)業(yè)的手性色譜柱,手性色譜填料研發(fā)及生產(chǎn)廠(chǎng)家,是手性分離材料與手性色譜柱領(lǐng)域專(zhuān)業(yè)化運營(yíng)的中國品牌,廣州研創(chuàng )生物可提供手性藥物分離純化及工業(yè)制備的一體化解決方案,包括手性分析方法開(kāi)發(fā)及手性制備分離制備服務(wù)等,http://www.airkangen.com/。


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