柱長(cháng),內徑,如250*4.6mm,一般柱長(cháng)在2—250mm,柱越長(cháng),分離度越高,但柱壓更高,分離所需時(shí)間更長(cháng),但分離度與理論塔板數的平方根成正比,所以一昧增加柱長(cháng)并不是最有效的分離手段,一般情況下,150mm,5um的填料可以提供足夠的塔板數。
粒徑,影響色譜分離度,粒徑越小,分離越快,柱效越高,但柱壓力越高,柱容易被污染,導致柱壽命降低,常見(jiàn)分析柱通常使用5um填料,復雜的多組分樣品分離一般使用3.5um粒徑,更大內徑的制備色譜柱通常使用更色譜柱大的粒徑,如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小的粒度的填料是很有用的,3.5um填料填充柱的柱效比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%,然而,3.5um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍,因此如何選擇填料粒徑需要根據現實(shí)情況而定,本文來(lái)源于國內領(lǐng)先的第三方檢測平臺嘉峪檢測網(wǎng),提供檢測實(shí)驗,技術(shù)培訓,儀器計量校準服務(wù)。
孔徑,60A,120A,300A等,孔徑小,則含孔率高,比表面積大,載碳量高,色譜柱色譜柱填料孔徑大小需和分子大小相匹配,保證分子自由進(jìn)出填料孔并與孔內表面的鍵合相進(jìn)行分離分配,通常要求孔徑直徑是分子直徑的3倍以上,一般小分子使用80—120A,大分子使用300A。
顆粒形狀,一般有球形和不規則形,當使用黏度較大的流動(dòng)相時(shí),球形顆??梢越档椭鶋?,延長(cháng)色譜柱壽命。
色譜柱的技術(shù)都有哪些,比如封尾等,這些技術(shù)在應用時(shí)都體現在哪里。
色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料技術(shù)自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響,裝柱技術(shù)也沒(méi)有想象中的這么簡(jiǎn)色譜柱單,不同固定相,不同粒徑,不同柱管內徑和長(cháng)度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密,穩定,均一的柱床,更多是一門(mén)藝術(shù),需要經(jīng)驗積累。
國內和國外想比,我認為色譜柱的差距在于:國內公司以前都不會(huì )自己開(kāi)發(fā)填料,一般買(mǎi)國外現成填料裝柱,買(mǎi)到的填料質(zhì)量控制權不在自己手里,另外因為裝柱歷史短,經(jīng)驗積累少,裝柱工藝也沒(méi)有完全達到國外水平,另外,對色譜柱性能很關(guān)鍵的基礎材料-----裸硅膠,國產(chǎn)的還不過(guò)關(guān),在純度,粒徑和孔徑的均一性方面和國外產(chǎn)品相比,差距很大。
廣州研創(chuàng )是國內專(zhuān)業(yè)的手性色譜柱,手性色譜填料研發(fā)及生產(chǎn)廠(chǎng)家,是手性分離材料與手性色譜柱領(lǐng)域專(zhuān)業(yè)化運營(yíng)的中國品牌,廣州研創(chuàng )生物可提供手性藥物分離純化及工業(yè)制備的一體化解決方案,包括手性分析方法開(kāi)發(fā)及手性制備分離制備服務(wù)等,http://www.airkangen.com/。