色譜柱化學(xué)性質(zhì)。
硅膠基質(zhì):最通用的基質(zhì),強度大,化學(xué)修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。
聚合物基質(zhì):多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學(xué)穩定,應用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好,但強度較小,有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損,批次重復性較差,商品化色譜柱不多,一般價(jià)格較貴。
載碳量:基質(zhì)表面色譜柱鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。
鍵合相:鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長(cháng)鏈的烷基鍵合相(C18C8)比短鏈的(C4C3)穩定,非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩定。
封端:用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來(lái),以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現象,尤其對于極性樣品而言,色譜柱未封端處理的色譜柱分離效果較差。
在氣相色譜分析中,一般采用注射器或六通閥門(mén)進(jìn)樣,在考慮進(jìn)樣技術(shù)的時(shí)候,以注射器進(jìn)樣為主來(lái)研究。
進(jìn)樣量:進(jìn)樣量應控制在瞬間氣化,達到規定分離要求和線(xiàn)性響應的允許范圍內,填充柱沖洗法的瞬間進(jìn)樣量:液體樣品或固體樣品溶液一般為0.01~10μl,氣體樣品一般為0.11~10ml,在定量分析中,應注意進(jìn)樣量讀數準確。
注射器里空氣的排除:用微量注射器抽取液體樣品,色譜柱只要重復地把液體抽入注射器又迅速把其排回樣品瓶,就可以將空氣排除,或著(zhù)用計劃注射量的約2倍的樣品置換注射器3~5次,每次取到樣品后,垂直拿起注射器,針尖朝上,留在注射器里的空氣都應當跑到針管頂部,推進(jìn)注射器塞子,空氣就會(huì )全部被排掉。
保證進(jìn)樣量的準確:用經(jīng)置換過(guò)的注射器取約計劃進(jìn)樣量2倍左右的樣品,垂直拿起注射器,針尖朝上,讓針穿過(guò)一層紗布,這樣可用紗布吸收從針尖排出的液體。
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