色譜柱操作時(shí)常見(jiàn)的問(wèn)題

　　在我們實(shí)驗室中色譜柱的使用一直是非常重要的，而色譜柱的使用需要一定的知識儲備，如果對于色譜柱的使用不了解的話(huà)，就很容易出現各種問(wèn)題，影響實(shí)驗的進(jìn)程，那么下面就來(lái)看看那色譜柱操作時(shí)常見(jiàn)的問(wèn)題吧！

　　1、裝柱

　　柱子下面的活塞一定不要涂潤滑劑，會(huì )被淋洗劑帶到產(chǎn)品中的，可以采用四氟節門(mén)的。干法和濕法裝柱覺(jué)得沒(méi)什么區別，只要能把柱子裝實(shí)就行。裝完的柱子應該要適度的緊密（太密了淋洗劑走的太慢），一定要均勻（不然樣品就會(huì )從一側斜著(zhù)下來(lái)）。

　　書(shū)中寫(xiě)的都是不能見(jiàn)到氣泡，我覺(jué)得在大多數情況下有些小氣泡沒(méi)太大的影響，一加壓氣泡就全下來(lái)了。當然如果你裝的柱子總是有氣泡就說(shuō)明需要多練習了。但是柱子更忌諱的是開(kāi)裂，甭管豎的還是橫的，都會(huì )影響分離效果，甚至作廢！

　　2、加樣

　　用少量的溶劑溶樣品加樣，加完后將下面的活塞打開(kāi)，待溶劑層下降至石英砂面時(shí)，再加少量的低極性溶劑，然后，再打開(kāi)活塞，如此兩三次，一般石英砂就基本是白色的了。加入淋洗劑，一開(kāi)始不要加壓，等溶樣品的溶劑和樣品層有一段距離（2～100px就夠了），再加壓，這樣避免了溶劑（如，二氯甲烷等）夾帶樣品快速下行。

　　3、淋洗劑的選擇

　　感覺(jué)上要使所需點(diǎn)在Rf0.2~0.3左右的比較好。不要認為在板上爬高了分的比較開(kāi)，過(guò)柱子就用那種極性，如果Rf在0.6，即使相差0.2也不容易在柱子上分開(kāi)，因為柱子是一個(gè)多次爬板的狀態(tài)。