色譜柱它是一種分離分析手段,分離是核心因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。
1、用過(guò)濾和脫氣的流動(dòng)相(不含緩沖鹽)徹底沖洗色譜儀的泵和管路,務(wù)必使系統中不含氣泡。
2、根據色譜柱上所標示的流動(dòng)相流向,將色譜柱入口與泵端管路相連,柱出口不連。
3、將泵的流速設為0.1mL/min或更低,流速緩慢地.上升到正常流速(t>5min)。
4、當溶劑從色譜柱出口端自由流出時(shí),將流速設為0,把柱出口與檢測器端的管路相連。
5、用10-30倍柱體積的流動(dòng)相、正常流速平衡色譜柱。
6、氨基柱、氰基柱既可在正相環(huán)境下使用,也可在反相環(huán)境下工作。當需要從反相變?yōu)檎嗷蛘嘧優(yōu)榉聪鄷r(shí),需要用20-30倍柱體積的THF作為過(guò)渡溶劑沖洗系統,否則易使泵的單向閥堵塞,出現壓力異常的現象。
為了使色譜柱與儀器系統達最佳的連接效果,應盡量使用與色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來(lái)的接頭長(cháng)期匹配其他類(lèi)型的色譜柱,建議在連接新色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成色譜柱的損壞或因色譜柱不匹配造成的漏液。